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型號:11-8025

常規PCR Kit(一步法)

描述:VenorGeM支原體污染檢測試劑盒(一步法)支原體PCR檢測 采用常規PCR方法,并包含PCR需要的所有試劑。其中引物和dNTP、DNA聚合酶、內控對照都包含在PCR預混液(Mix)干粉中。重懸緩沖液復溶Mix干粉,分裝到PCR管中,分別加入細胞上清(陰性對照)、復溶的陽(yáng)性對照DNA和待測樣品(細胞上清或提取的樣本DNA),進(jìn)行PCR反應。常規PCR Kit(一步法)

  • 廠(chǎng)商性質(zhì)

    代理商
  • 更新時(shí)間

    2024-05-17
  • 訪(fǎng)問(wèn)量

    3618
詳細介紹
品牌其他品牌產(chǎn)地類(lèi)別進(jìn)口
應用領(lǐng)域醫療衛生,化工,生物產(chǎn)業(yè)

常規PCR Kit (一步法)

Venor®Gem OneStep


品名

貨號

規格

價(jià)格

常規PCR Kit (一步法)

Venor®Gem OneStep

11-8025

25次/盒

詢(xún)價(jià)

11-8050

50次/盒

詢(xún)價(jià)

11-8100

100次/盒

詢(xún)價(jià)

11-8250

250次/盒

詢(xún)價(jià)


常規PCR Kit(一步法)介紹:

常規PCR法:是根據支原體核糖體16s-23s rRNA的特異保守序列設計引物,對待檢樣本DNA進(jìn)行擴增,通過(guò)對擴增產(chǎn)物的大小分析作出診斷。

優(yōu)點(diǎn):①靈敏度高,特異性好。②時(shí)間短,2-3小時(shí)出結果。③符合歐洲藥典。④操作簡(jiǎn)單。

缺點(diǎn):①對于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結果會(huì )出現假陽(yáng)性。(可用培養法做補充驗證)。②不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大(由于引物及內在設計不同),需謹慎選擇,盡量在專(zhuān)業(yè)人員推薦指導下使用。


『支原體常規PCR檢測試劑盒』介紹:

德國MB公司生產(chǎn)的支原體常規PCR檢測試劑盒,依據操作步驟的細微差別,分一步法和經(jīng)典法兩類(lèi)。此兩類(lèi)試劑盒較全球其他廠(chǎng)家同類(lèi)產(chǎn)品,具有以下*的優(yōu)點(diǎn):

①高特異性,270bp左右的一條陽(yáng)性對照條帶,涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種,操作簡(jiǎn)單,結果易于觀(guān)察。(使用MB的試劑盒,下表列出的支原體物種均為陽(yáng)性,其他微生物或真核細胞均為陰性。根據16s rRNA序列的同源性比對,該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體。)

②高靈敏度,1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。

③試劑盒含內控對照,可防止假陰性的發(fā)生。

④符合歐洲藥典要求。


常規PCR Kit(一步法)適用范圍:

A. 科研用戶(hù),細胞上清的篩查可選用MB公司生產(chǎn)的支原體常規PCR檢測試劑盒(一步法)。(詳見(jiàn)下文)

【Venor® Gem OneStep (貨號:11-8050)】或【Venor® Gem Advance (貨號: 11-7096)】


B. 對于需遵循藥典要求的生物制藥企業(yè),可選用MB公司生產(chǎn)的支原體常規PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)。

【Venor® Gem Classic(貨號: 11-1050) 】+ Taq酶  (貨號: 53-1050)】

或【Venor® Gem Classic  (貨號: 11-1050G)】


特點(diǎn):

1. 內控對照已加在預混液中,無(wú)需另外配置,使用便捷。
2.高特異性,僅一條陽(yáng)性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。

操作簡(jiǎn)單,易于觀(guān)察。

3.高靈敏度,1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。
4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體。


操作步驟:

下列圖示以Venor® Gem OneStep?支原體?常規PCR?檢測試劑盒?(一步法)( 貨號:11-8050)  為例,具體產(chǎn)品操作以說(shuō)明書(shū)為準。

第1步:樣本處理


第2步:試劑制備


第3步:PCR體系建立


第4步:?jiǎn)?dòng)PCR反應


第5步:電泳結果分析

191bp為內控對照條帶,表明PCR反應正常。

當樣本存在支原體污染時(shí),由于內控對照與支原體DNA存在競爭,內控對照條帶變弱(例如支原體DNA>103拷貝)。

陽(yáng)性對照中支原體DNA>104拷貝,內控對照條帶會(huì )*消失。

可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶,此條帶不影響檢測結果。

如果待測樣本對PCR產(chǎn)生抑制,則內控對照條帶變弱(和陰性對照相比),此時(shí)應先進(jìn)行DNA抽提(推薦使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒),然后再檢測。

儲存條件

2~8℃至少12個(gè)月。復溶后必須在-18℃保存。


效期

1年6個(gè)月


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